一

背景与目的

克罗恩病 （CD） 和溃疡性结肠炎 （UC） 是慢性炎症性肠病 （IBD），其缓解和复发过程需要定期随访。内窥镜检查是 IBD 监测的金标准，因为它直接可视化粘膜以评估炎症的存在。然而，内窥镜检查昂贵、耗时，会给患者带来不适，并且需要肠道准备。为了克服这些局限性，已经提出了使用粪便钙卫蛋白（FC）的方法。FC 被认为是肠粘膜中中性粒细胞浸润的替代非侵入性标志物，FC 水平升高与肠道炎症有关。FC 在 IBD 患者的管理中发挥着越来越重要的作用。它与疾病的内镜和组织学活动密切相关，可以区分 IBD 和肠易激综合征 （IBS），评估疾病活动和对治疗的反应，并预测疾病复发。尽管其临床实用性已得到证实，但 FC 测量之间存在高度差异，因此无法定义全球公认的 FC 结果解释临界值。FC 测量包括两个主要阶段，即分析前阶段和分析阶段。分析前阶段包括粪便取样、收集、储存和 FC 提取的时间。要使用的测试和结果解释的阈值必须在分析阶段确定。每个步骤都会影响 FC 结果，并导致 FC 测量的异质性。需要强调的是，这一过程中的错误会导致对疾病活动的评估受损，影响医疗决策过程并导致过度治疗或治疗不足。迄今为止，还没有关于 FC 测量的标准化。因此，经过全面的文献回顾，旨在就 FC 测量的分析前和分析阶段提供明确的立场声明，以使 FC 水平均匀化，并通过国际共识最大限度地减少可变性和误解风险。

二

方法

2020 年 7 月 17 日，来自 11 个国家的 14 名具有 IBD 和 FC 领域专业知识的医生参加了虚拟国际共识会议。进行了系统的文献研究，并在参与者之间共享和讨论文献证据。会议对发言进行了起草、讨论和表决。如果所有与会者都同意，则发言被视为已获批准。如果某项声明未获得一致接受，则重新讨论和修改，直到所有与会者都批准为止。所有专家都参与了手稿的起草，并批准了其最终版本。

三

结果

分析前阶段

声明 1：粪便应收集在专用的清洁容器中，不含添加剂，以避免任何意外污染。

最常见的粪便采样方法是使用一个专用容器，该容器的盖子上装有勺子，这使患者能够以卫生、安全和方便的方式处理粪便。此步骤的一个关键方面是避免样品被液体（例如水或尿液）污染，以防止样品稀释，但要患者保证，如果他们排出液体粪便，仍应收集液体粪便。Lasson等人发现，粪便稠度与FC水平显著相关，粪便液体越多，FC 浓度越高。液体粪便的存在不是 FC 检测的禁忌证，因为它是活动性疾病患者中最常见的情况。迄今为止，尚不清楚液体粪便对 FC 值的影响是由于与收集液体粪便的难度增加相关的技术问题、采样异质性问题，还是由于这些患者的疾病活动度增加。

声明 2：粪便采样的最合适时机尚不清楚。

同日内不同时间和不同样本之间FC值存在高度变异性，有人指出，排便间隔时间越长，FC 值越高，这表明早上的第一个样本可能是首选，因为它保证了没有夜间排便的患者的最长间隔。鉴于这种变异性，应建议患者在连续的 FC 测量中大约同时采集粪便样本。

声明 3：对单个粪便样本的分析通常足以进行 FC 测量。

是否需要重复 FC 检测存在很大争议。尽管 FC 测量之间存在个体内部差异，但不建议连续两天重复 FC 评估。相反，谨慎的做法是在几周内重复该程序，以防出现可能影响治疗决策的临界值，或者怀疑测量不准确和导致结果无效的因素。

声明 4：粪便稠度会影响 FC 提取。

提取阶段允许将钙卫蛋白从粪便中分离出来。首先称量粪便，然后将其放置在缓冲液中以获得蛋白质提取。称量可以手动执行，但目前最好使用特定于试剂盒的配套采样装置，以收集预定量的粪便并减少样品操作。粪便稠度与FC水平显著相关，粪便应在提取缓冲液中稀释，并最终离心。

声明 5：室温下粪便储存最好限制在 3 天以内，但最多 1 周仍是可以接受的。如果样品在 7 天内无法处理，则粪便应储存在 -20 °C 的冰箱中，以实现最佳保存效果。

粪便采样和分析之间的延迟会导致样本变质并使 FC 结果无效。最好尽快处理和分析粪便样本。钙卫蛋白的物理特性使其在最佳条件下在室温下稳定 3 天，在可接受条件下最多稳定一周，FC 浓度降低最小。如果采集和分析之间有进一步的延迟，应冷冻未处理的粪便样本以避免其变质或重复采样。

分析阶段

声明 6：建议对 FC 测量进行定量测试。酶联免疫吸附测定 （ELISA） 检测和自动 ELISA 检测具有准确的分析性能，应首选。POCT 检测和家庭检测是 ELISA 检测的有效替代方案。

越来越多的证据表明，不同的 FC 值可能与 IBD 患者的不同结局相关，包括内窥镜活动或缓解以及疾病的组织学缓解。因此，对于临床医生来说，量化 FC 浓度具有极其重要的意义。因此，建议进行定量测试而不是定性测试，因为后者仅根据制造商提供的范围和临界值表示阳性或阴性结果，而不表示 FC 值。ELISA 测试是 FC 测量中最常用的定量测试，ELISA 测试具有准确的分析性能，但非常耗时，因为它们通常每 1 或 2 周进行一次批量程序。POCT 测试使用特定的侧向层析免疫测定，与传统 ELISA 检测高度相关，其直接和间接成本均低于传统的ELISA检测。家庭测试允许直接在家中测量 FC，需要高度的患者依从性和充分的培训，以避免减少测试依从性或测量误差。

陈述 7：没有足够的证据支持使用一种特定的 FC 检测方法。

有多种检测方法可用于 FC 监测，并且有几项研究比较了它们的操作特性，以确定临床实践中使用的最佳方法。总体而言，所有检测方法均显著相关（p < 0.05），并且没有一种方法被证明优于其他方法。需要对大型 IBD 人群进行进一步的比较研究，以评估特定的 ELISA 检测、POCT检测或家庭检测是否比其他检测具有更好的诊断准确性。

声明 8：FC 检测方法不可互换，因为不同方法之间存在很大差异。如果可能，应使用相同的 FC 检测方法对个体患者进行连续 FC 测量。

研究发现，不同的 FC 临界值，不同的检测方法，FC 水平差异交大。对于患者随访，应优先使用相同的检测方法。在新治疗开始时获得 FC 的参考粪便样本，该样本可以与基线时的内窥镜评估进行比较，从而确保可靠性。这可以评估 FC 趋势，并可用于患者监测、预测疾病的任何复发并促进结果的解释。

声明 9：FC 测量结果的解释应包括对可能影响测试的因素的评估。

FC 是肠道炎症的标志物，但它对 IBD 没有特异性，因为一些胃肠道疾病、药物和生活方式可以改变其浓度。在IBS、结肠息肉、结肠憩室病、结肠癌、消化道出血、胃肠道感染、显微镜下结肠炎、放疗后直肠炎、贮袋炎、风湿性疾病和肝硬化患者中发现FC值升高（见表2）。此外，一些药物，如非甾体抗炎药 （NSAID） 和质子泵抑制剂 （PPI） 与 FC 水平升高有关。

长期使用非甾体抗炎药可导致非甾体抗炎药诱发的肠病，其特征是肠糜烂和溃疡。因此，非甾体抗炎药应在 FC 测量前至少两周停用。PPI 治疗后 FC 升高的基本原理尚不清楚，但可能与抑制胃酸产生有关，导致肠道细菌过度生长。票价：同样，PPI 应在 FC 测量前 4 周暂停，以便充分清除药物并防止任何测量偏差。

此外，据报道，患者的年龄，包括年轻（<9 岁）和老年患者（>65 岁）、体重指数（肥胖）、缺乏体力活动、肛周疾病、造口术的存在和肠道准备是与 FC 值升高相关的因素。

在IBD妇女怀孕期间发现FC水平逐渐降低的趋势，这表明孕妇发生的免疫变化可能与对疾病活动的有益影响有关。

在日常临床实践中，医生应评估 FC 浓度与内窥镜和组织学数据之间的一致性，如果没有发现相关性或存在影响 FC 水平的因素，则应在几周后重复 FC 测量。

四

填补研究空白

尽管 FC 在 IBD 患者的管理中发挥着越来越重要的作用，但一些研究问题需要进一步解决。FC测量的标准化可以减少研究之间的异质性，并获得更可靠的数据。首先，有必要确定粪便收集的时间是否会影响测量结果，明确重复 FC 测量是否有用（图1）。其次，应研究在室温下储存粪便的最佳策略，并应进行评估 3 或 7 天内分析的粪便样本中 FC 浓度的比较研究来解决这个问题。第三，有必要确定如何处理液体粪便，因为这是IBD患者最常见的情况，确定粪便收集和均质化的最佳方法。第四，应进行大型多中心研究，以确定可重复性并确认可用 FC 测试的诊断准确性。第五，迄今为止，还没有普遍接受的 FC 临界值来区分活动或疾病缓解。FC检测的均质化可以使临床医生识别和验证预测疾病活动的阈值，指导治疗决策，并为IBD患者提供新的靶向治疗。

五

结论

FC 越来越被认为是 UC 和 CD 的治疗靶点，通常用于 IBD 患者的日常实践和临床试验。几个预分析和分析变量会影响 FC 测量。该共识总结了现有数据，并提出了有关FC测量的建议，以标准化方法。这是关于这一议题的第一次国际共识。统一接受的 FC 检测方案可以减少批间变异性并提高测量可靠性。此外，需要使用标准化方法进行大型研究来确定 FC 临界值、预测疾病活动度和指导治疗决策。